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材料和方法
研究区域和采样
该研究于 2009 年 11 月（冬季）和 7 月进行 2010 年（夏季）。 桡足类是在 Billefjorden 收集的， 相对较深（最大 200 m 深度）阈值峡湾 斯匹次卑尔根岛西海岸，斯瓦尔巴群岛，2009 年 11 月 16 日 和 2010 年 7 月 19 日（图 1）。 这个季节性冰雪覆盖的峡湾 以其庞大的 C. glacialis 种群而闻名（Arnkvaern 等。 2005年； 加布里埃尔森等人。 2012）。
图 1 研究区与 采样站 BAB in Billefjorden 用星星表示
手持式 SAIV CTD（电导率、温度和 密度）与荧光计连接用于测量 水文图和荧光作为代表 水体中的叶绿素 a (chl a) 生物量 两个采样日期。 7 月，Niskin 瓶在标准深度（5、35 和 50 m) 使用荧光法测定 chl a 生物量 Holm-Hansen 和 Riemann (1978) 的方法。
实验的桡足类由 WP3 收集 具有 1 m-2 开口和 1 mm 网孔尺寸的封闭网 配备大型（10 升）非过滤鳕鱼端。 从结束 6 月至 12 月底，C. glacialis CV 非常 在这个峡湾中含量丰富（Arnkvaern 等人，2005 年）。 每月 2008 年 7 月至 2009 年 8 月对 Billefjorden 浮游动物群落的调查表明，C. glacialis CV 主要存在于 6 月至 50 m 的上层 50 m。 7 月，当它们在 8 月和 100 米深处下降时 一直呆到 12 月（JE S?reide unpubl. 结果）。 为了增加捕获C. glacialis的机会 CV 滞育，网部署在 180 到 11 月 100 m，假设深度处的 Calanus 是 当时处于滞育状态（Hirche 1996; Falk-Petersen et al. 2009）。 相反，为了捕捉活跃的 C. glacialis CV 7 月，凯发手机app官网从上层 50 m （Hirche 1996；Falk-Petersen 等人，2009）。 动物是 在转移回实验室的过程中，在 40 升的容器中保持黑暗 实验室（大约 4-6 小时）。 在这里，它们被排序 尽快（在 2 天内）在冷藏室 -1 在微光下的立体显微镜中 (10–50 lmol m-2 s-1 ）。 C. glacialis CV 占优势 WP3 中的 Calanus 物种和发育阶段 两个采样日期的样本 ([90 %)，所以时间 Calanus 属 将体视显微镜中的光暴露在最低限度 (\5 分钟)。 凯发手机app官网确定 根据 Arnkvaern 等人确定的 prosome 大小对物种进行分类。 (2005)。 基因研究表明， 当使用这些传统的形态特征时，即不存在 C. finmarchicus 误解 C. glacialis 的风险，即结合前体长度和桡足类 物种分离阶段，在 Billefjorden (Gabrielsen 等。 2012）。
治疗
已排序的 C. glacialis CV 被转移到已过滤的 在连续光照或连续光照下的海水 (FSW) 或单一栽培的 Thalassiosira antarctica（食物） 黑暗，总共有四种不同的治疗方法： 深色 + FSW、深色 + 食物、浅色 + FSW 和浅色 + 食物。
光源是天花板上的两个灯管（菲利普斯 TL-M 115W/33-640 RS)，以及仅放置的附加灯 以上实验（奥登工作灯38W）。 之光 光合有效辐射（PAR 400-700 nm）为 使用余弦校正平头参考传感器（Quantum Li-190SA；LiCor）测量，表明桡足类 在光处理中暴露于*50 lmol m-2 s-1 对应于在无冰环境中观察到的光强度 春季的 Kongsfjorden（北纬 79 度，斯瓦尔巴群岛）（Leu 等人，2006 年）。 黑暗治疗被放置在同一个冷室，但 被黑色塑料袋覆盖，并进行光线测量 确认在该处理中没有可测量的光。 在 11 月，每个处理包括一个 40-l 每个桶有大约 600 个桡足类，没有重复， 而在 2010 年 7 月，每个治疗包括三个 重复，每个重复在 1-l 玻璃杯中包含 15 个桡足类 瓶子放置在缓慢旋转的浮游生物轮中。 对彼此而言， 11 月和 7 月，进行了呼吸测量 在实验的前 2 天（第 1-3 天） 处理 Dark+FSW 被认为是原位碳 C. glacialis CV 的基线需求。
为了模拟开花条件 (*15–22 lg chl l-1 )，藻类食物浓度为 4,500 个细胞 ml-1 11 月和 7 月的 1,200 个细胞 ml-1。 藻类食物 11 月的浓度保持较高（*4,500 个细胞 毫升-1 ) 比 7 月 (*1,200 细胞 ml-1 ) 因为藻类 在不旋转的大桶中迅速沉到底部。
呼吸
每 3 天，在 9 天内，将 15 只新桡足类的三次重复转移到 250 毫升的生物需氧量中 (BOD) 装有 FSW 或食物的瓶子，放置在 光明或黑暗，作为他们的初始治疗。 BOD瓶 允许在没有空气的情况下密封。 此外，空白，即水 没有桡足类的治疗（有和没有食物）是 在相同条件下培养以测量 其他代谢活动引起的耗氧量 比桡足类呼吸（即藻类生长、细菌产生）。 每 6-8 小时监测一次氧气，持续 36 小时 氧传感器微传感器（Unisense A/S、Aarhus、 丹麦），确保氧气浓度 从未低于初始值的 15-20%（Renaud et al. 2007）。 对于每个时间间隔（第 1-3 天、第 4-6 天和第 7-9），每个人的耗氧率计算为回归线的（负）斜率 在氧气浓度和时间之间，退出 空白值。 为了能够比较结果 从本研究与其他已发表的研究中，率 被转换为碳需求，假设呼吸 1 mol O2 的系数：0.97 mol CO2（Hernandez-Leon 和 池田 2005）。 碳需求也转化为碳特定（C-specific）需求，使用平均 桡足类碳含量为 361 ± 97 SD lgC ind-1 in 冬季和夏季 479 ± 119 SD lg C ind-1 (B. Niehoff，来自 Billefjorden 11 月的未公开数据 2009 年和 2010 年 7 月）。
统计分析
对于这两个实验，碳特定需求的影响 使用双向方差分析对食物状态和光照状态这两个主要因素及其相互作用进行了分析， 其次是LSD事后测试。 对于这两个季节，所有处理和时间的特定碳需求率为 通过单向方差分析测试，然后是 LSD post hoc 测试。 夏季（7 月）和冬季的基线值 (11 月) 通过 t 检验进行比较。 常态和 先前测试了方差的同质性。 对所有人 统计结果，p\0.05 的概率被认为是 显着地。 使用以下方法进行统计分析 Statgraphics Plus (Manugistics Inc., Rockville, MD, USA)。
